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1988年1月31日，进入杰尼斯事务所；4月，成为SMAP初期12名成员之一；9月，加入为光genji持剑伴舞而结成的组合平家派，后自然解体。同年10月，出演由SMAP主演的悬疑剧《危险少年3》。
1991年，参演TBS台校园剧《先生のお気に入り！》。1992年4月，出演个人首部音乐剧《阿国》。同年5月、7月又分别出演了音乐剧《MASK》和少年队原创音乐剧《PLAYZONE'92さらばDiary》。1993年，搭档国分太一、山口达也等出演情感剧《同窗会》。1994年，参演由少年队成员东山纪之主演的职业剧《拥抱黑夜》。
1995年9月4日，V6结成，11月1日发行单曲《MUSICFORTHEPEOPLE》正式出道。同年3月，出演舞台剧《魔女宅急便》，并与远藤直人作为doublecast交替出演；该舞台剧还于1996年5月举行了再演，坂本昌行与长野博、原知宏共同作为三重角色交替演出。1996年3月，出演富士台月十剧《好日子远行》。
1999年，以マーサ坂本的名义担任了迪斯尼电影《泰山》日本版主题曲《You'llBeinMyHeart》及其插曲的演唱工作。12月31日，随V6首次在NHK红白歌合战中的《英雄传说》单元作为嘉宾登台献唱。
2000年3月，随20thcentury三人主演舞台剧《东京サンダンス?俺たちの20世纪?》。同年9月，首部由他单独担任主演的音乐剧《瑟堡的雨伞》在东京和大阪两地开演。
2001年2月，推出舞台剧续篇《东京サンダンス?21世纪への伝言》。4月，参演少年队冠名综艺番组《少年タイヤ》内电视剧《室温?夜の音楽?》。同年9月，出演百老汇音乐剧《Footloose》。2002年1月11日，参与杰尼斯事务所举行的成人礼并参拜明治神宫，为成年的樱井翔、泷泽秀明、今井翼担任立会人。同年4月，随20thcentury主演舞台剧《花川助六物语》，饰演炸猪排店“助六”的店主、前暴走族的队长花川助三郎。
2003年10月，与赤坂晃作为doublecast交替双主演百老汇音乐剧《BloodBrothers》。11月，V6集体主演由萨布执导的悬疑喜剧电影《不幸运英雄》，坂本昌行饰演上班族池山忠志。2004年4月，20thcentury三人主演舞台剧《SAYYOUKIDS》，饰演前银行职员野木良治。
2005年2月-3月，主演舞台剧《NEVERGONNADANCE》。6月，主演百老汇音乐剧《THEBOYFROMOZ》，由于演出反响热烈，该作品分别于2006年10月和2008年10月举行了舞台再演。10月，V6再次集体主演电影，出演由萨布执导的悬疑喜剧电影《笨贼丧擒救世主》，该片为V6十周年纪念电影作品。2006年4月，主演《剧团演技者》第17回公演作：《复制品》。同年6月，客串由丰川悦司主演的电视剧《垃圾律师》最终话。
2007年6月，出演舞台剧《NOMAN'SLAND》。同年12月，主演百老汇音乐爱情喜剧《AllShookUp》，并于2009年10月举行舞台再演。
2010年7月，主演舞台剧《没有不在场证明的天使》，饰演专门伪造不在场证明的男人西村鉄雄；10月，在百老汇音乐剧《PalJoey》中饰演主角流浪歌手；11月，通过ZAI好莱坞英雄音乐剧日本版《ZORROTHEMUSICAL》的角色甄选，得到了出演主角佐罗的机会，该舞台作品由吉普赛国王乐队担任作曲，约翰·卡梅隆负责作曲、剧本改编，还曾获得劳伦斯·奥利弗奖。该次试镜可以说是坂本自1988年杰尼斯事务所入所以来所取得的重要工作之一。2011年1月，《ZORROTHEMUSICAL》正式在东京日生剧场开演，并于3月分别在名古屋中日剧场和大阪梅田艺术剧场展开巡回演出。
2012年3月，主演百老汇爱情音乐剧《MYONEANDONLY》，饰演梦想着乘飞机进行世界史上第一次大西洋无着陆横断飞行的Billy。同年4月，开始在富士电视台午间前开设的生活情报节目《Nonstop！》中出演该节目美食环节“OneDish”，每周五为观众介绍并亲手制作一道美食。同年5月，客串出演由大野智主演的月九推理剧《上锁的房间》第6话，饰演编剧鬼冢隼人。7月，与若村麻由美、渡边一计等合作，时隔四年出演由森村诚一同名小说系列改编的日剧特别篇《搜查线上的咏叹调》，饰演编辑部的出版负责人夏川孝文。
2013年6月，搭档户田惠子、新妻圣子、铃木综马主演音乐剧《银匙映月》，饰演主人公——大宅院家庭的次子敷岛绫佑。同年11月，搭档东山纪之，交替双主演舞台剧《弗兰肯斯坦》，同时饰演科学怪人维克多·弗兰肯斯坦博士和怪物。
2014年9月~10月，20thCentury时隔十年再次共同主演音乐剧，出演了曾获得托尼奖的百老汇舞台音乐剧《ONTHETOWN》日本版。同年，客串出演由浅野优子主演、同组合成员三宅健出演的午间剧《无法放任不管的魔女们》。12月31日，随V6首次以正式歌手身份在第65届NHK红白歌合战上登场。
2015年8月22日-23日，V6与同事务所后辈Hey！Say！JUMP联合担任第38届《24小时电视·爱は地球を救う》主持人，该届主题为“つなぐ?时を超えて笑颜を?”。该节目取得瞬间最高收视率达到34.6%（关东地区），两天平均收视率在关东地区达到15.4%，关西地区达到14.8%。同年12月31日，随V6再次登场红白歌合战。
2016年2月5日-7日，在东京举办首次个人音乐剧演唱会《ONEMANSTANDING》，这也是杰尼斯事务所艺人首次挑战演唱全编音乐剧曲目的个人演唱会。4月，参加杰尼斯事务所举办的棒球大会，还通过全垒打斩获了比赛的MVP。同年5月-6月，合作松尾贵史出演百老汇爆笑音乐剧《MURDERFORTWO》，两人在其中一共饰演了包括老人和女人在内的十三个角色。为了演好角色的钢琴戏份，他提前半年就借好了钢琴每天在家中用三四个小时的时间来练习，也凭借在此部作品中的表演获得了第24回读卖演剧大奖的优秀男演员奖。12月31日，随V6连续第三年参加红白歌合战。
2017年1月~2月，随20thCentury主演舞台剧《TWENTIETHTRIANGLETOUR戸惑いの惑星》，坂本昌行饰演三池。同年6月，首次在东京新国立剧场表演舞台剧，在《你的人生时光》中饰演主角ジョー。与此同时，还出演了WOWOW电视台对第71届托尼奖颁奖仪式的预热节目特别篇，并于6月12日搭档音乐剧演员井上芳雄在WOWOW播放的《现场转播！第71届托尼奖颁奖仪式》节目中合唱片头曲。
2018年6月11日，连续两年出演WOWOW电视台的托尼奖颁奖仪式转播节目，在节目中担任特别嘉宾。11月~12月，搭档多部未华子，主演由1935年美国歌舞喜剧电影《礼帽》改编的同名音乐剧，在其中饰演歌舞艺人弗雷。
2019年5月22日-26日，在东京再次举办个人音乐剧演唱会，标题为《ONEMANSTANDING2019TheGreatestSymphony》。7月27日，随20thCentury主演舞台剧《TWENTIETHTRIANGLETOUR(TTT)》的第2弹《カノトイハナサガモノラ》。
家中在龟户经营蔬果店，是蔬果店“坂本商店”家中的第三子，熟悉蔬果知识，也培养出了对料理的兴趣。因为双亲工作繁忙从小就经常自己动手制作料理，生活中就是一个料理人。也因此在富士台午间生活情报节目中开设了美食环节“OneDish”，还于2014年发行了个人料理书《坂本昌行的OneDish》。
1997年12月，坂本昌行随V6参与的限定慈善义演团体J-Friends成立。J-Friends由杰尼斯事务所旗下三个偶像团体TOKIO、V6、KinKiKids组成，目的是为1995年日本阪神大地震的灾民进行赈灾募款。
2011年4月1日-3日，坂本昌行与其他的杰尼斯事务所旗下艺人在东京代代木第一体育馆前为“311东日本大地震”举行赈灾筹款活动，并呼吁“大家一起重建令世界夸耀的日本吧”。活动三天间共计有38万9000人前来捐款，截至2012年3月10日，共计筹得8亿2655万3991日元善款，加上11日活动当天的善款，全部捐给分属受灾最严重的岩手县、宫城县和福岛县的“岩手学习希望基金”、“东日本大地震宫城儿童育英基金”和“东日本大地震福岛儿童寄附金”等基金会。
2015年8月，所在组合V6与同事务所后辈Hey！Say！JUMP联合担任由NTV举办的慈善节目第38届《24小时电视·爱拯救地球》主持人。
舞台剧奖项
自从2000年主演音乐剧《瑟堡的雨伞》以来，坂本昌行就以出色的演唱功底在音乐剧业界获得了相当高的评价，是颇有实力的音乐剧演员。即使无伴奏也能演唱的音量和保持良好的音域，在事务所内说他的歌唱功力好几乎没有争议。而且他的歌唱能力也与舞台相称，牢靠的高音和清楚的口齿，使观众们的内心都被歌词所感染。同时，他还具有良好的舞台礼仪，认真地致力于舞台工作，是一位能够演好各种完全不一样角色的专业舞台人。